标题

研究法医样品中血迹沉积时间(TSD)的新方法

提交日期

2018

文档类型

论文

学位名称

法证科学理学硕士

部门

法医科学

顾问

克莱尔·l·格林

委员会成员

大卫·圣皮特

委员会成员

克里斯蒂娜鸡头

关键字

分光光度法

网

分光光度法、碱性磷酸酶

LCSH

血迹,分析刑事调查方法

没有打电话。纽黑文大学图书馆

AS36。N29。Sci 2018 7号

摘要

血液是暴力犯罪中最常见的生物液体，可以在DNA图谱和模式分析方面提供证明证据。然而，在确定创伤或事件造成的血迹沉积时间方面，这些污渍也可以揭示以前未开发的潜力。估计血迹沉积时间(TSD)的能力在过去的研究中使用了许多不同的方法，然而，结果不同，没有一个完全一致的方法实现到实际的案例工作。本研究的目的是调查各种方法，显示潜在的TSD估计。这包括随着时间的推移进行调查;酶活性，总蛋白的定量和分光光度观察，以及两种RNA的降解。

经机构审查委员会(IRB)批准后，在知情同意的情况下，将志愿者的静脉血收集到无菌EDTA真空管中。将100 uL的血液沉积在白色棉布上，一式三份，在凉爽、黑暗的环境中老化24小时、48小时、1周、2周、1月、3月、6月、9月和1年。碱性磷酸酶(ALP)的酶活性测定采用比色反应，测定采用Nanodrop®OneC紫外可见分光光度计。提取总蛋白，定量，并用紫外可见分光光度计观察。使用RNeasy迷你试剂盒提取总RNA，定量，并使用靶向β -actin和18s RNA的RT-PCR进行表达分析。

分光光度法观察ALP的酶活性后，用标准曲线测定其浓度。结果发现，从新鲜血液到1年血液，其浓度从178.9 U下降到0 U。当检测定量总蛋白量时，发现其下降幅度没有那么大，在同一一年期间从5.912 mg/mL下降到2.783 mg/mL。当每个样品用分光光度法观察时，在412 nm指定λ， 541 nm指定β和576 nm指定α处看到三个比峰。然而，在225 nm和295 nm观察到两个额外的峰。从22.159 ng/uL到7.000 ng/uL的所有样品中提取的总RNA的可量化量，没有观察到随时间增加或减少的真实趋势。在所有样本中都检测到β -肌动蛋白和18S RNA，并且在3个月的时间内表现出表达一致的总体趋势，然而，6个月后样本显示不一致。

这项研究表明，使用几种不同的方法，在估计血迹的TSD能力方面具有巨大的潜力。作者认为，不是单一的方法就能提供答案，更重要的是，多种方法相互配合的使用最终将为调查者提供更大的准确性。

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